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抗萬古霉素腸球菌(VRE)顯色培養(yǎng)基使用說明書
組 分
科瑪嘉抗萬古霉素腸球菌(VRE)基礎(chǔ)培養(yǎng)基和增補劑各一瓶。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:瓊脂:15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉:20.0 g/L 氯化鈉:5.0g/L
色素:27.3 g/L
增 補 劑:0.06 g/L
pH值:6.9
操 作
1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:取瓶內(nèi)干粉67.3 g溶于1000 mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照67.3 g/L的比例擴大或縮小制備培養(yǎng)基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀荩敝?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、增補劑:取增補劑0.06g溶于1mL50% 酒精溶液(0.5mL無水乙醇+0.5mL無菌水)中,攪拌混勻。也可按照60mg/L的比例擴大或縮小制備增補劑的量。增補劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,配制好的增補劑在-20℃下保存,有效期為一個月。
4、把混勻后的增補劑加入到冷卻至45℃~50℃的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中(增補劑的終濃度為60mg/L),輕輕搖動使其充分混勻,傾注平皿,使其凝固,晾干備用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存1個月(2℃~8℃,避光)。
接種
劃線或涂布接種(冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫),在36
結(jié)果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
VRE腸球菌(VRE.faecium VRE.faecalis) | 粉色至淡紫色 |
VRE鶉雞腸球菌(VRE.gallinarum)、VRE酪黃腸球菌(VRE.casselifalvus) | 藍色或抑制 |
其他革蘭氏陽性菌 | 抑制 |
革蘭氏陰性菌 | 抑制 |
酵母菌和霉菌 | 大都抑制 |
性能及局限
最終鑒定需要做補充試驗。一些乳酸桿菌、片球菌可能會出現(xiàn)淡紫色菌落,可通過PYR(吡咯烷酮芳基酰胺酶)試驗進行排除,PYR結(jié)果為陽性的是VRE,PYR結(jié)果為陰性的是乳酸桿菌、片球菌。培養(yǎng)時間超過24h后,一些罕見的鶉雞腸球菌可能出現(xiàn)淡紫色菌落。
貯存條件
基礎(chǔ)培養(yǎng)基和增補劑均貯存于15℃~30℃干燥環(huán)境中,在有效期前使用。
污染處理
使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。
附:供體外診斷使用,產(chǎn)品須專業(yè)人員操作。
科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基
科瑪嘉VRE顯色培養(yǎng)基